Efecto de la temperatura de almacenamiento de epidídimos de todo sobre la calidad espermática de semen criopreservado
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Data
2019Autor
Palabras Clave
Espermatozoides, Epidídimo, Congelación, Sistemas CASASperm, Epididymis, Thawing, CASA system
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La conservación de espermatozoides de epidídimo es una técnica ampliamente usada en animales de alto valor genético, así como en animales silvestres muertos inesperadamente. Uno de los inconvenientes que influyen en la motilidad y integridad de membranas (plasmática y acrosomal) así como en la capacidad de fertilización de los espermatozoides epididimarios recuperados es la temperatura de almacenamiento post mortem de los epidídimos. El objetivo de esta investigación fue determinar la calidad espermática pre congelación y post descongelación de espermatozoides epididimarios de toros (Bos taurus) de la Amazonía ecuatoriana recuperados de testículos almacenados 5 o 20°C por un corto tiempo. Para este propósito se obtuvieron diez pares de testículos recogidos de un matadero. Los testículos izquierdos y derechos de cada animal fueron almacenados a 5 o C (T-5) y 20 o C (T-20), respectivamente durante 6 horas (h). La recuperación espermática fue realizada por flujo retrógrado de la cola del epidídimo y el líquido obtenido fue procesado con diluyente AndroMed® a una concentración de 200 x 10 6 espermatozoides/ mililitros mL y cargado en pajuelas de 0,25 mL. Las pajuelas de ambos grupos, T-5 (n = 30) y T-20 (n = 30), fueron congelados en vapores de nitrógeno líquido y descongeladas a 37°C durante 60 segundos (seg). El efecto de la temperatura de almacenamiento de epidídimos post mortem fueron evaluados por un análisis de varianza (ANOVA) de una vía. Los resultados obtenidos mostraron que en el análisis pre congelación, los porcentaje de motilidad (MIP, evaluada por microscopía óptica), vitalidad espermática (V, integridad de la membrana plasmática evaluada por la tinción de eosina / nigrosina) y anormalidades morfológicas totales (AT) de los espermatozoides del grupo T-5 no mostraron diferencias significativas (P > 0,05) con respecto al grupo T-20. En el análisis post descongelación, asimismo los parámetros de motilidad (analizados por un sistema CASA. SpermVision®, Minitube, Alemania) así como las AT, no evidenciaron diferencias significativas (P>0,05) entre los grupos T-5 y T-20. El porcentaje de V post descongelación fue superior (P<0,05) con el grupo T-5 en comparación con el grupo T-20 (63,0 ± 2,6% y 52,9 ± 3,0%, respectivamente). No obstante, en la evaluación de la funcionalidad de la membrana plasmática mediante prueba hipoosmótica (HOST) mostró mayores porcentajes (P<0,05) con el grupo T-20 en comparación con el grupo T-5 (40,4 ± 3,26% y 31,3 ± 1,99%). En conclusión, los resultados sugieren que, a pesar de las controversias encontradas en la integridad y funcionalidad de la membrana plasmática luego de la descongelación, los epidídimos de toros sacrificados en condiciones ambientales de la Amazonía ecuatoriana pueden ser almacenados a 5 o 20oC durante un corto período de tiempo y obtener una motilidad e integridad morfológica post descongelación similar. Se recomienda realizar estudios adicionales para evaluar la capacidad de fertilización de éstos espermatozoides mediante la Inseminación Artificial (IA) bajo condiciones de campo.
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Otros Títulos | Effect of storage temperatures of bull’s epididymis on frozen-thawed sperm quality |
Correo Electrónico | armando.quintero@fcv.luz.edu.ve andres.galarza@ucuenca.edu.ec. |
Editor | SaberULA |
ISSN | 0798-2259 |
ISSN Electrónico | 2477-944X |
Resumen en otro Idioma | Epididymis sperm conservation is a technique widely used in animals of high genetic value as well as in wild animals dead unexpectedly. One factor that most influence in motility and sperm membrane integrity (plasma and acrosomal) as well as the fertilizing ability of epididymal spermatozoa recovered is post-mortem temperature storage of epididymis. The objective of this study was determinate sperm quality pre-freezing and post-thawed of bull epididymal sperm (Bos taurus) from the Ecuadorian Amazon recovered from testicles stored to 5 or 20oC for short-time. For this propose, ten pairs of testicles were collected from slaughterhouse. Left and right testicles of each bull were storage at 5oC (T-5 group) or 20oC (T-20 group), respectively during 6 hours (h). Sperm recovery was performed by retrograde flow of the epididymis tail and the liquid obtained was diluted in AndroMed® extender at concentration of 200 x 10 6 spermatozoa/ mililiters mL and packed in 0.25 mL straws. Both straws T-5 (n = 30) and T-20 (n = 30) groups were frozen in vapors of nitrogen liquid and thawed at 37oC for 60 seconds (sec). The effect of storage temperature of epididymis post-mortem were assessment by ANOVA-one way. The results showed that in pre-freezing analysis, the percentage of motility (analyzed by optical microscopy), sperm vitality (V, plasma membrane integrity analyzed by eosin- nigrosine stain) and total morphological abnormalities (TA) of spermatozoa of T-5 group did no showed significant differences (P>0.05) compared with T-20 group. In post-thawed analysis, likewise the motilities variables (assessed by CASA system, SpermVision®, Minitube, Germany) as well as TA did no showed significant differences (P>0.05) between T-5 and T-20 groups. Sperm vitality (V) in samples thawed was higher (P<0.05) with T-5 group than T-20 group (63.0 ± 2.6% y 52.9 ± 3.0%, respectively). However, in plasma membrane functionality analysis assessed by hypoosmotic test (HOST) showed higher values (P<0.05) with T-20 group than T-5 group (40.4 ± 3.26% y 31.3 ± 1.99%). In conclusion, the results suggest that, despite the controversies found in the integrity and functionality plasma membrane post-thawed, the epididymis from Bull slaughtered under environment conditions of Ecuadorian Amazon may be storage at 5 or 20oC during short-term. Additional studies should be made to evaluate the fertilizing ability of these epididymal sperm after artificial insemination (AI) under filed conditions. |
Colación | 454-463 |
País | Venezuela |
Institución | Universidad del Zulia (LUZ) Universidad de Los Andes (ULA) |
Publicación Electrónica | Revista Científica |