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Aislamiento y caracterización parcial de una Proteasa con actividad semejante a la callikreina de las posturas de Hylesia metabus (Crammer 1775) (Lepidoptera: Saturnidae), comunicación preliminar

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portada2.jpg (7.332Kb)
articulo4.pdf (59.77Kb)
Fecha
2009-04-02
Autor
Lundberg, Ulf
Osborn, Frances
Carvajal, Zoila
Gil, Amparo
Guerrero, Belsy
Arocha Piñango, Carmen Luisa
Palabras Clave
Hylesia metabus, Calicreina, Proteasa
Hylesia metabus, Kallikrein, Protease
Metadatos
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Resumen
Hylesia metabus es una mariposa nocturna distribuida principalmente en el nor-oeste de Venezuela. Las hembras adultas usan sus vellos abdominales para cubrir y proteger los huevecillos de parásitos y depredadores. Estos vellos tienen propiedades urticantes, causando una dermatitis severa entre la población humana, cuyos síntomas se acentúan al usar jabón y se mejoran al aplicar soluciones de un pH ligeramente bajo tal como el vinagre. Sin embargo los vellos de los machos adultos no causan síntoma alguno. En el presente estudio se aisló y caracterizó en forma parcial una proteasa con propiedades parecidas a la calicreina de los vellos presentes en el abdomen de las hembras adultas. El material proteico de las posturas, constituidas por los vellos abdominales de la hembra, fue extraído en tampón Tris-Salino pH 8.5. El extracto fue centrifugado y luego cromatografiado en una columna de exclusión molecular (Sephadex G-75). La actividad biológica de los picos obtenidos fue determinada midiendo la actividad amidolítica con el sustrato cromogénico S-2288 (diseñado para serinaproteasas de amplio espectro) y S-2302 (diseñado para calicreina). Las fracciones con actividad en sustrato S-2302 fueron concentradas mediante ultrafiltración y usadas para otros experimentos. La medición de especificidad a substratos cromogénicos mostró una preferencia para el substrato S-2302 seguido por S-2288. La actividad enzimática tuvo su máximo a pH 9, mientras que por debajo de pH 5 no hubo actividad. Los resultados del presente estudio apoyan la idea de que esta sustancia puede tener importancia en las lesiones cutáneas observadas en personas expuestas a las posturas o las hembras adultas.
URI
http://www.saber.ula.ve/handle/123456789/27609
Colecciones
  • Revista Científica - 2002 - Vol XII - No. 002
Información Adicional
Otros TítulosIsolation and partial characterization of a Protease with kallikrein-like activity from the egg-nests of Hylesia metabus (crammer 1775) (lepidoptera: saturnidae), preliminary communication
ISSN0798-2259
Resumen en otro IdiomaHylesia metabus is a species of moth, distributed principally in North Eastern Venezuela. Adult females use their abdominal hairs to cover and protect the eggs from predators and parasites. These hairs have urticating properties, causing a severe dermatitis in humans, whose symptoms worsen using soap and are alleviated by slightly acid substances e.g. vinegar. The hairs from male moths however do not produce any symptoms. In the present study we have isolated and partially characterized a protease with kallikrein-like activity from the female abdominal hairs of this species. Egg-nests (consisting mainly of female abdominal hairs) were collected from the twigs of mangrove-trees in affected areas after hatching. The proteic substances were extracted into Tris-buffered saline solution at pH 8.5, centrifuged, and chromatographed by size-exclusion chromatography (Sephadex G-75). Biological activity in the peaks was determined by amidolytic activity in the chromogenic substrates S-2288 (Broad Spectrum Serine Protease Substrate) and S-2302 (Kallikrein substrate). The eluates showing biological activity were concentrated by ultrafiltration and used for further analyses. The specificity in chromogenic substrates showed a preference for the kallikrein substrate S-2302 followed by the broad-spectrum serine protease substrate S-2288. In addition the enzyme showed a pH optimum at pH 9, with no activity below pH 5. Thus the results of the present study support the hypothesis that this substance may be of importance in the lesions observed in individuals exposed to adult females or the egg-nests.
Colación97 - 102
PeriodicidadBimestral
InstituciónUniversidad del Zulia (LUZ)
Universidad de Los Andes (ULA)
Publicación ElectrónicaRevista Científica

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