Desarrollo y validación de un método rápido por cromatografía líquida de alta resolución con inyección directa de la muestra para la determinación de atenolol, propranolol y carvedilol en plasma humano

Abstract

En el presente trabajo se desarrolló un método automatizado y robusto para la determinación simultánea de atenolol, propranolol y carvedilol en muestras de plasma humano por cromatografía líquida de alta resolución (CLAR) con detección por fluorescencia. La inyección directa de las muestras de plasma se efectuó en una precolumna con empaque de acceso restringido LiChrospher RP-18 ADS (alquil diol sílica) integrada en un sistema de columnas acopladas bajo la modalidad de transferencia indirecta reversa. La separación cromatográfica de los analitos se realizó en una columna Altantis T3® (150 mm x 3,0 mm d.i. y 5 µm d.p.) y se utilizó la optimización multivariada para lograr la mejor resolución y tiempo de análisis. La validación del procedimiento se evaluó de acuerdo a la normativa vigente, la Farmacopea de los Estados Unidos (USP) y de la Conferencia Internacional de Armonización (ICH). El método propuesto se aplicó exitosamente en el análisis de muestras de plasma de individuos bajo tratamiento médico con los fármacos, con una frecuencia de análisis de 10 muestras h-1.